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豚鼠乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒

用 途：
豚鼠LDH ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、緩沖液中細胞上清液及各種體液中的LDH 。本試劑盒可以檢測天然和重組的LDH 。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。

試驗原理：
豚鼠LDH 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知LDH 濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將LDH 和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中LDH 的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料
1． 蒸餾水。
2． 加樣器：5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。

豚鼠乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒

安全性
1． 此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性，但沒有實驗室可*保證此血制品不會傳染肝炎、AIDS或其它傳染病，依據(jù)當(dāng)?shù)氐陌踩珬l例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。
2． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
3． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
4． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作注意事項
1． 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
2． 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

豚鼠乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒

樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

操作步驟
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2． 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3． 加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。
4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作四次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育15分鐘。避免光照。
8． 取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9． 在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié)果分析
以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應(yīng)的LDH 標準品濃度為橫坐標（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的LDH 含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。

局限
6號標準品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

豚鼠乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒

試劑盒性能
1． 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2． 特異性：不與人其它細胞因子反應(yīng)。
3． 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
Omeprazole 奧美拉唑 [73590-58-6] 25g
Orange I 橙黃 I [523-44-4] 25g
Ovalbumin from Egg White 卵清蛋白 [9006-59-1] 1g
Ovalbumin from Egg White 卵清蛋白 [9006-59-1] 5g
6-Nitrobenzimidazole 6-硝基苯并咪唑 [94-52-0] 5g
 

豚鼠乳酸脫氫酶ELISA 檢測試劑盒

2-Nitrobenzoic acid 2-硝基苯甲酸 [552-16-9] 25g
3-Nitrobenzoic acid 3-硝基苯甲酸 [121-92-6] 25g
4-Nitrobenzoic acid 4-硝基苯甲酸 [62-23-7] 25g
3-Nitrobenzonitrile 3-硝基苯腈 [619-24-9] 25g
4-Nitrobenzyl bromide 4-硝基溴化芐 [100-11-8] 5g
2-Nitrobenzyl alcohol 鄰硝基芐醇 [612-25-9] 25g
4-Nitrobenzyl alcohol 對硝基芐醇 [619-73-8] 25g
4-Nitrobenzyl chloride 4-硝基芐氯 [100-14-1] 5g
5-Nitro-2-furaldehyde diacetate 5-硝基糠醛二乙酯 [92-55-7] 100g
Nitrofurantoin 呋喃妥因 [67-20-9] 50g
Nitrofurantoin 呋喃妥因 [67-20-9] 250g
5-Nitroguaiacol 5-硝基愈創(chuàng)木酚 [636-93-1] 100g
5-Nitroindazole 5-硝基吲唑 [5401-94-5] 100g
PAN 1-（2-吡啶偶氮）-2-萘酚 [85-85-8] 5g
PAN 1-（2-吡啶偶氮）-2-萘酚 [85-85-8] 25g
1-Nitro-2-naphthol-3,6—disulfonic acid disodium salt 亞硝基紅鹽 [525-05-3] 25g
1-Nitro-2-naphthol-3,6—disulfonic acid disodium salt 亞硝基紅鹽 [525-05-3] 100g
2-Nitrophenol 2-硝基酚 [88-75-5] 50g
3-Nitrophenol 3-硝基酚 [554-84-7] 25g
4-Nitrophenol 4-硝基酚 [100-02-7] 100g
2-Nitrophenol sodium salt 鄰硝基苯酚鈉 [824-39-5] 250g
4-Nitrophenylacetic acid, 對硝基苯乙酸 [104-03-0] 100g
4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosaminide 硝基苯基-2-乙酰氨基-2-脫氧-b-D-葡萄糖苷 [3459-18-5] 50mg
4-（4-Nitrophenylazo）-1-naphthol 鎂試劑 II [5290-62-0] 25g
Patent Blue VF 藍五號鈉鹽 [129-17-9] 25g
Patent Blue VF 藍五號鈉鹽 [129-17-9] 25g
p-Nitrophenyl-azo-orcinol 鈹試劑Ⅰ [607-96-5] 10g
4-（p-Nitrophenyl-azo）-resorcinol 鎂試劑 I [74-39-5] 25g
4-Nitrophenyl α-L-fuco­pyran­oside, 4-硝基苯-Α-L-吡喃海藻糖苷 [10231-84-2] 100mg
p-Nitrophenyl β-D-glucopyranoside 對硝基苯基-beta-D-吡喃葡萄糖苷 [2492-87-7] 100mg
4-Nitrophenyl β-D-glucuronide 4-硝基苯基-beta-D-葡萄糖醛酸苷 [10344-94-2] 500mg
α-p-Nitrophenylglycerol 1-（4-硝基苯基）甘油 [2207-68-3] 100mg