質(zhì)粒純度不高解決辦法
1.混有蛋白：不要使用過(guò)多菌體。經(jīng)溶液P1、P2、P3處理，離心后溶液應(yīng)為澄清的，如果還混有微小蛋白懸浮物可再次離心去除后再進(jìn)行下一步驟。
2. 混有RNA：RNaseA處理不干凈，請(qǐng)減少菌體用量或加入溶液P3之后室溫放置一段時(shí)間。如果溶液P1已保存6個(gè)月以上，請(qǐng)?jiān)谌芤篜1中添加RNaseA。
3. 混有基因組DNA：加入溶液P2和P3后應(yīng)溫和混勻，如果劇烈振蕩，可能把基因組DNA剪切成碎片從而混雜在質(zhì)粒中。如果加入溶液P2后過(guò)于粘稠，無(wú)法溫和混勻，請(qǐng)減少菌體用量。細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞和DNA的降解，培養(yǎng)時(shí)間不要超過(guò)16小時(shí)。
4. P3溶液加入時(shí)間過(guò)長(zhǎng)：P3溶液加入后，放置時(shí)間不要太長(zhǎng)，否則有可能會(huì)產(chǎn)生小片段DNA污染。
5. 含大量核酸酶的宿主菌：宿主菌含大量核酸酶，在質(zhì)粒提取過(guò)程中降解質(zhì)粒DNA，影響提取質(zhì)粒DNA的完整性，/好選用不含核酸酶的大腸桿菌宿主菌。
6. 質(zhì)粒的二聚體和多聚體形式：質(zhì)粒復(fù)制過(guò)程中形成的，與宿主菌相關(guān)，電泳可檢測(cè)出多條條帶，單酶切處理后可變成單一條帶。
以上是分享有關(guān)質(zhì)粒純度不高解決辦法。上海通蔚生物科技有限公司將進(jìn)一步加強(qiáng)人才培養(yǎng)、產(chǎn)品創(chuàng)新，持續(xù)不斷地提升企業(yè)核心竟?fàn)幜?，?shí)現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識(shí)化創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)的化大集團(tuán)企業(yè)，更好、更快捷、更*的服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域，迎接新一輪世界經(jīng)濟(jì)一體化所帶來(lái)的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。
上海通蔚生物科技有限公司
地址：上海市金山區(qū)楓涇鎮(zhèn)環(huán)東一路65弄2號(hào)3463室
主營(yíng)產(chǎn)品：酶聯(lián)免疫試劑盒，食品農(nóng)殘檢測(cè)，細(xì)胞系，培養(yǎng)基，胎牛血清
©2019 版權(quán)所有：上海通蔚生物科技有限公司 備案號(hào)：滬ICP備14033764號(hào)-3 總訪問(wèn)量：1299901 站點(diǎn)地圖 技術(shù)支持：環(huán)保在線 管理登陸