小鼠ELISA試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗(yàn)中關(guān)鍵的一步，稍有不慎將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)滿盤皆輸，如何安全，快捷的處理樣本，樣本處理小鼠ELISA實(shí)驗(yàn)使用注意事項(xiàng)及試驗(yàn)操作關(guān)鍵希望能幫助大家。 小鼠ELISA試劑盒使用方法：
1、血清：操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
9、底物請避光保存。
小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作注意要點(diǎn)：
血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來，在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。
混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價(jià)跌落，所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存按小鼠ELISA試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測量較正。
對于科研人員來說小鼠ELISA試劑盒原理和操作步驟并不陌生，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，操作過程中夾雜著洗滌和封閉步驟。然而，即使是平淡無奇的洗滌和封閉，如果操作不合理，也會很大程度上影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確度。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時我們是否能獲得有意義而且準(zhǔn)確的信息，這在很大程度上取決于操作結(jié)果的正確與否。
